TERAPIA GENICA CIRROSIS

Titulo:TERAPIA GÉNICA CON uPA HUMANO INDUCE LA REGENERACIÓN HEPÁTICA.
Gen a tratar: gen del activador de Plasminógeno Urokinasa humano (huPA) .
Vector: Adenovirus con el gen p-gal

Vía de administración: Una vez cargado el vector viral se puede administracion via vena iliaca.
Método: Con vector viral en ratas. 

Procedimiento:  a determinar el nivel de regeneración hepática
para "rellenar" los espacios originados por la degradación de la ECM detectando por
inmunohistoquímica en cortes de hígado la proliferación de hepatocitos usando un Ac ami
PCNA,
Ei 55 de) parénquima hepático se indujo a regenerar dado que encontramos ese
porcentaje de
células positivas a antaPCNA en las zonas periportal y centrilobular 2 días después de la
administración de AdAhuPA.'comparado con 67% de proliferación celular basal en animales
cirróticos inyectados con AdGFP Además, se encontró una sobreexpresión del gen HGF en
animales tratados con AdAhuPA y sólo una menor expresión en animales cirróticos controles. Esta
sobrexpresión del gen es más notable en cmet (receptor para HGF) después de los 2 días de la
administración de AdAhuPA sugiriendo que la proliferación de células hepáticas es controlada por
este mecanismo.

Resultados: Se encontró un pequeño incremento del peso del hígado a los 10 días sugiriendo
que no están involucrados mecanismos "anormales" reguladores del crecimiento celular. Las PFHs
ALT. AST. fosfatasa alcalina y tiempos de protocombina tendieron a normalizarse al final del tratamiento





FUENTE:
http://www.respyn.uanl.mx/especiales/genetica/terapia_y_transgenesis.html

TERAPIA CON STEM CELL PARA LA CIRROSIS

Terapia para la cirrosis hepática, con énfasis en describir la situación científica actual y las
implicaciones clínicas de los avances. 

Se ha propuesto la terapia celular en cirrosis por la
escasez de donantes de hígado y las complicaciones derivadas de la terapia inmunosupresora.

Las células madre se pueden obtener de diferentes fuentes como el blastocisto, la médula ósea
e incluso hepatocitos maduros; pero la capacidad de proliferación y diferenciación de cada
uno de estos tipos celulares es distinta y, entre otras consideraciones, es lo que va a definir su
utilidad clínica final.

FUENTE:
www.redalyc.org/pdf/1805/180522525005.pdf

¿PORQUE LA DIABETES ES UN FACTOR DE RIESGO PARA LA CIRROSIS NO ALCOHOLICA?

 La explicación podría estar relacionado con la obesidad y el sobrepeso que son, sin duda, los factores más relevantes en el desarrollo de HGNA,siendo el más importante la obesidad, característica que es, asu vez, la expresión de un conjunto de hábitos de vida,costumbres y comportamientos particulares de los gruposhumanos. Estos pueden expresarse a través de malos hábitos alimentarios, falta de actividad física de utilidad biológica y estilos de vida deteriorados. Existe una clara asociación entre obesidad y diabetes mellitus, la que incluso guarda relación dosis-efecto, siendo tanto más frecuente la diabetes cuanto

mayor es el grado de obesidad del individuo

El Hígado y el páncreas detectan el exceso de azúcar en la sangre lo queproduce un aumento de la insulina y finalmente acumulaciónde grasa en el hígado. El hígado acumula el exceso de azúcaren forma de grasa pues esta es la forma de almacenar energía cuando hay exceso de ella.

FUENTE:
http://www.scielo.org.pe/pdf/rgp/v30n1/a02v30n1
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/cuerpomedicohnaaa/v4n2_2011/pdf/a02v04n2.pdf

TRANSGENICOS EN LA CIRROSIS : ARROZ TRANSGENICO

La albumina es la proteína intravenosa más utilizada en el mundo con fines terapéuticos. Sirve para estabilizar el volumen sanguíneo y evitar el riesgo de infarto, y su aplicación en los quirófanos es prácticamente diaria, Se emplea en hemorragias, quemaduras, operaciones de cirugía o cuando el paciente presenta desnutrición o deshidratación, infecciones crónicas y enfermedades renales o hepáticas
Para la producción de la proteína, los científicos chinos han manipulado los granos de arroz, con el objetivo de que éstos produzcan grandes cantidades de esta sustancia.
Durante la fase de pruebas del experimento, se empleó la albúmina obtenida para el tratamiento de ratas con cirrosis, una de los múltiples funciones que tiene esta proteína en humanos, ya que el déficit de esta proteína está ligado a patologías hepáticas. 
Fuente:
http://cienciasycosas.com/2011/11/02/que-avance-supone-la-obtencion-de-albumina-a-partir-de-arroz-transgenico/

ADN RECOMBINANTE EN LA CIRROSIS

 En la cirrosis no alcoholica el uso de ADN recombinante se lo puede realizar por la leptina recombinante
El tratamiento con leptina recombinante humana mejora la esteatosis hepática asociada a los síndromes lipodistróficos. Esto se evidencia por la reducción o normalización de las transaminasas, la reducción del volumen hepático y por la disminución del contenido en lípidos de los hepatocitos .

En cuanto a los efectos sobre la esteatosis hepática, debemos tener en cuenta que la leptina es una hormona lipo-reguladora que controla la homeostasis lipídica en tejidos no-adiposos particularmente durante periodos de sobreingesta . 
Así, se ha sugerido que la leptina regula la homeostasis intracelular de ácidos grasos protegiendo a los tejidos, y al hígado en particular, de la lipotoxicidad. La leptina activa la AMPK, frena la lipogénesis y

promueve la oxidación de ácidos grasos mediante la inactivación de la acetil CoA carboxilasa

FUENTE: 
http://www.justdocument.com/download/17861196239/expresion-de-leptina-humana-recombinante-purificacion-e-inmunologia-y-bioactividad/
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0016508512006828
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S1022-51292003000400004&script=sci_arttext
http://www.endocrinologiapediatrica.org/modules.php?name=articulos&idarticulo=223&idlangart=ES

MICROARRAYS CIRROSIS HEPATICA

En este ensayo se realiza una microarrays primero dividiendo a los pacientes de acuerdo al grado de inflamacion y fibrosis. se incubo 40 ug de ARN 37º-30min y se efectuo una doble extraccion, se hibrido el 5mg de ARN hepatico mediante un CDS primer mix. 

Se dejo reposar durante la noche a 68º. la señal se detecto al exponer la membran a -70º durante 5 dias y se capto por un software de Bio-Rad Quantity OneTM, la visualizacion se dio por marcar los genes (ubiquitina, GAPDH, HLA C-4, β-actin, tubulina, alfa 1, proteína ribosómica) y se valido con una PCR. d

  Fuente:   
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1130-01082008000400004&lng=en&nrm=iso&tlng=en

PCR CIRROSIS HEPATICA

TEMA: Alteraciones del factor del crecimiento B1 asociado a cirrosis
OBJETIVOS: Analizar los polimorfismos de TGF B1 en la cirrosis
MUESTRA: Sangre
AN:DNA nuclear extraido por un kit comercial 
GEN: TGFB1

TIPO DE PCR: PCR-AMP
PASOS:
D- 95º por 5 min 35 ciclos
H- 64-45s

E- 72º por 1 min
VISUALIZACION:Electroforesis

  Fuente:    
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1043466608001233